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酶标仪的检定内容包括哪些部分
发布时间:2020-06-25 点击量:105
 
  酶标仪在实验室中的应用越来越普及,酶标仪的检定也就越来越重要。酶标仪的检定内容主要包括干涉滤光片波长误差及重复性、吸光度误差、稳定性和重复性、仪器灵敏度、通道差异及吸光度的线性。
  吸光度示值稳定性(r)的检定:
  选用492nm波长或仪器特有的专一波长,将吸光度标称值为1.0A的光谱中性滤光片,平放在微孔酶标板的空板架上,以空气为参比,测量并记录酶标仪的初始吸光度示值(A0),5min、10min后分别再测一次。吸光度示值稳定性(r)计算:r等于后两次吸光度示值的最大值与A0的差。
  波长示值误差和波长重复性的检定:
  从酶标仪取出仪器所用有标称波长(λ)的干涉滤光片(405,450,492,620nm),使用波长示值误差优于±0.5nm的分光光度计,将干涉滤光片用1mm左右铜或铝金属丝悬挂固定于分光光度计比色杯架第二孔右外侧,干涉滤光片平面需与入射光束垂直。以1nm的改变幅度,从低到高,检测各干涉滤光片在(±20)nm范围内的透射比,绘制波长一透射比特性曲线,求出峰值波长(λi),每片干涉滤光片重复检测三次并求峰值波长均值。
  干涉滤光片波长示值误差(△λ)计算:△λ=峰值波长均值-λ;波长重复性(δλ)计算:δλ等于三次检测峰值波长最大值和最小值之差。
  吸光度示值误差的检定:
  先将吸光度标称值(A)分别为0.2,0.5,1.0,1.5的四块光谱中性滤光片(分光光度计附件),在分光光度计上依次选用405,450,492,630nm波长或酶标仪特有的专一波长,以空气为参比,检测光谱中性滤光片的吸光度。每个滤光片每个波长检测三次,取均值作为该片在该波长下的吸光度标准值(As)。然后,将四块光谱中性滤光片同时平放在微孔酶标板的空板架上,以空气为参比,酶标仪连续测量3次,依次记录仪器吸光度示值,并计算平均值(Ax)。
  吸光度示值误差(△A)计算:△A=Ax-As,取计算后的所有△A中的误差最大值作为该酶标仪的吸光度示值误差。
  吸光度重复性的检定:
  按吸光度示值计算的方法将吸光度标称值(A)为0.5或1.0光谱中性滤光片,以空气为参比,于酶标仪微孔酶标板的空板架某一固定孔位重复测定6次(n),记录每一次吸光度(Xi),求吸光度均值,按下式计算RSD偏差值(RSD),以RSD表示仪器吸光度重复性。
  
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